小鼠elisa试剂盒
小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒
小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)的含量
小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)的含量
■郑重申明:本公司销售所有产品均为实物拍摄,如产品出现质量问题,本公司包一切售后!!
■所有ELISA试剂盒包邮,并免费提供代测服务,试剂盒重复性好,灵敏度高,抗体特异性强,检测范围可按照具体实验要求调整,有专业耐心的售前售后服务!!
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20
分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS
(0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成
名称 |
96孔配置 |
48孔配置 |
备注 |
微孔酶标板 |
12孔×8条 |
12孔×4条 |
无 |
标准品 |
0.3mL*6管 |
0.3mL*6管 |
无 |
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
无 |
检测抗体-HRP |
10mL |
5mL |
无 |
20×洗涤缓冲液 |
25mL |
15mL |
按说明书进行稀释 |
底物A |
6mL |
3mL |
无 |
底物B |
6mL |
3mL |
无 |
终止液 |
6mL |
3mL |
无 |
封板膜 |
2张 |
2张 |
无 |
说明书 |
1份 |
1份 |
无 |
自封袋 |
1个 |
1个 |
无 |
备注:
1. 标准品浓度依次为:64、32、16、8、4、2 ng/mL
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。