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人elisa试剂盒

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

文字:[大][中][小] 手机页面二维码 2019/11/7     浏览次数:    

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人肿瘤坏死因子αTNF-α)的含量

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人肿瘤坏死因子αTNF-α)的含量


■郑重申明:本公司销售所有产品均为实物拍摄,如产品出现质量问题,本公司包一切售后!!
■所有ELISA试剂盒包邮,并免费提供代测服务,试剂盒重复性好,灵敏度高,抗体特异性强,检测范围可按照具体实验要求调整,有专业耐心的售前售后服务!!



有效期:6个月

保存条件:2-8℃

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人肿瘤坏死因子αTNF-α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子αTNF-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样本处理及要求

1.  血清将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。


需要而未提供的试剂和器材

1.  酶标仪(450nm)

2.  高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.  37℃恒温箱

4.  蒸馏水或去离子水

 

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

8×12

8×6

标准品

0.3mL*6

0.3mL*6

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

备注

1.  标准品浓度依次为:80、40、20、10、5、2.5 pg/mL

2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。


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